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成纖維細(xì)胞在不同形貌鈦合金表面上的生物學(xué)行為

2015-01-22 11:12    瀏覽:513    評(píng)論:0
IP屬地 陜西
  影響種植體周軟組織封閉的重要決定因素為種植體頸部的表面形貌。本實(shí)驗(yàn)旨在比較通過(guò)機(jī)械加工法(M)、直流電解蝕刻法(DC)、交流電解蝕刻法(AC)三種不同的方法處理鈦合金試件得到的三種不同的表面形貌對(duì)人牙齦成纖維細(xì)胞的附著的影響,尋找出一種有利于成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)以及軟組織附著的理想表面,為今后種植體頸部設(shè)計(jì)提供指導(dǎo)。方法:通過(guò)機(jī)械加工法(M)、直流電解蝕刻法(DC)、交流電解蝕刻法(AC)成形三種不同合金表面形貌,使用掃描電子顯微鏡觀(guān)察其表面微觀(guān)形態(tài),將其與成纖維細(xì)胞共同培養(yǎng),吖啶橙染色法檢測(cè)生物相容性;MTT法檢測(cè)表面細(xì)胞的增殖情況;掃描電鏡觀(guān)察表面細(xì)胞的形狀及排列。結(jié)果:通過(guò)機(jī)械加工(M)、直流電解蝕刻(DC)、交流電解蝕刻(AC)三種處理方法分別得到了較光滑的表面、微米-亞微米孔表面、微米-亞微米-納米結(jié)構(gòu)表面。通過(guò)吖啶橙染色法顯示成纖維細(xì)胞在三種表面形貌的鈦片上均具有良好的細(xì)胞活性,核仁清晰,胞漿飽滿(mǎn),提示三種表面形貌的鈦片均具有良好生物相容性。MTT結(jié)果顯示,三種表面形貌的鈦片吸光度值變化趨勢(shì)基本一致,均呈遞增趨勢(shì)。光滑表面組與微米-亞微米表面組和微米-亞微米-納米組表面吸光度值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在第3-5天,微米-亞微米-納米組表面吸光度值高于微米-亞微米表面,提示成纖維細(xì)胞在微米-亞微米-納米表面的增殖情況最優(yōu)。將成纖維細(xì)胞與三組鈦片共同培養(yǎng)的第3天,掃描電鏡觀(guān)察可見(jiàn),各組鈦件表面胞外基質(zhì)較少,可見(jiàn)明顯未被基質(zhì)覆蓋的溝、凹孔形態(tài)。M組鈦片低倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞扁平,呈圓形,近似平行排列,細(xì)胞長(zhǎng)軸與溝紋方向一致,伸展較差,高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞伸出許多微絨毛,偽足較少且短;DC組低倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞附著于微米孔內(nèi),伸展較好;高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞豐滿(mǎn),細(xì)胞表面微絨毛及突起較少,伸出的偽足較粗較長(zhǎng),錨固于微米孔壁上;AC組低倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞附著于微米孔內(nèi),形態(tài)更加伸展,高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞豐滿(mǎn),細(xì)胞表面有許多突起及微絨毛,伸出的偽足更寬更長(zhǎng),可成帶狀,相鄰細(xì)胞的偽足可發(fā)生融合。將鈦片與成纖維細(xì)胞共同培養(yǎng)的第7天,掃描電鏡觀(guān)察可見(jiàn),各組鈦件表面胞外基質(zhì)較第3天明顯增多。M組低倍鏡下可見(jiàn)材料表面溝紋被細(xì)胞外基質(zhì)大面積覆蓋,細(xì)胞呈圓形,伸展較差;高倍鏡下,細(xì)胞伸出的微絨毛緊密的貼在材料表面,細(xì)胞伸出的偽足較第3天增長(zhǎng)增多,相鄰細(xì)胞的偽足可相融合。DC組低倍鏡下可見(jiàn)微米孔被大量細(xì)胞外基質(zhì)覆蓋;高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞完全展開(kāi),呈扁平片狀,少量細(xì)胞呈球形,可能為基質(zhì)或細(xì)胞表面上新分裂的細(xì)胞,細(xì)胞伸出許多偽足和微絨毛,緊緊附著于微米孔的孔壁上。AC組低倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞分泌的基質(zhì)大面積覆蓋在材料表面,高倍鏡下可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)更加扁平不規(guī)則,細(xì)胞胞體位于微米孔內(nèi),向鄰近微米孔壁伸出大量偽足及絨毛,偽足可相互交織成網(wǎng)狀;細(xì)胞牢固的固定于微米孔中,可見(jiàn)長(zhǎng)梭形及球形新生細(xì)胞,有的細(xì)胞伸出細(xì)長(zhǎng)的偽足,呈懸空狀,可伸入到相隔較遠(yuǎn)的納米孔內(nèi)部。結(jié)論:通過(guò)交流電解蝕刻法形成的兼具微米-亞微米-納米三級(jí)孔結(jié)構(gòu)的鈦合金表面具有良好的生物相容性,能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞的附著,增殖及細(xì)胞基質(zhì)的分泌。通過(guò)該方法處理出的種植體頸部表面是一種較優(yōu)秀的表面,可為以后的相應(yīng)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及種植體表面處理提供指導(dǎo)。
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